Spleen cell proliferation during and after skin myiasis by human bot fly Dermatobia hominis / Proliferação de células do baço durante e após miíase por Dermatobia hominis

Spleen cells from mice were examined at 5, 10, 15, 20 and 25 days post-infection (dpi) with Dermatobia hominis larva and at 5, 10, 15, 30 and 60 days post-larval emergence (dple). Cell proliferation in vitro assays were carried out with RPMI-1640 medium and larval secretory product (LSP) of D. hominis at 5, 10, 15, 20 and 25 days. When each group of mice was tested against each medium, significance was only seen for 25 dpi, with increasing order: LSP-10 d, -25 d, -5 d, -20 d, -15 d and RPMI. Significant results were also observed when each medium was tested against mice at each dpi or dple. Each dple group vs. each medium produced significant results only for 10 dple, with increasing order: LSP-5 d, -20 d, -25 d, -10 d, -15 d and RPMI. Comparative tests were also carried out between groups to refine certain observations. The LSPs were also analyzed using SDS-PAGE. The results prove that myiasis caused depletion of spleen cells, particularly under the effect of the LSP-10 and -15, but the cells tended to increase up to 60 dple. This in vitro assay may represent the real systemic immune response in the relationship LSP-D. hominis-host.

Células do baço de camundongos foram examinadas aos 5, 10, 20 e 25 dias pós-infecção (dpi) com Dermatobia hominis e examinadas aos 5, 10, 15, 30 e 60 dias pós-emergência da larva (dpel). As células foram cultivadas em meio RPMI-1640 contendo, ou não (controle), produtos de secreção das larvas (PSL) de D. hominis com idade de 5, 10, 15, 20 e 25 dias. Em cada grupo com cinco camundongos testados nos meios de cultura, o número de células foi significativo para 25 dpi, com crescente aumento na seguinte ordem: PSL-10 d, -25 d, -5 d, -20 d, -15 d e RPMI. Resultados significantes foram também observados nos testes entre cada meio contendo células tanto de camundongos dpi ou dpel. Em cada dpel grupo versus meio significância foi somente verificada para 10 dpel, na ordem crescente: PSL-5 d, -20 d, -25 d, -10 d, -15 d e RPMI. Testes comparativos foram também realizados entre grupos. O PSL foi analisado sob SDS-PAGE. Os resultados provam que a miíase causou depleção de células do baço, particularmente sob efeito do PSL-10 e -15, mas ocorreu normalidade do número de células aos 60 dpel. Este ensaio in vitro pode representar uma resposta imune sistêmica na relação PSL-D. hominis-hospedeiro.

Expression of circulating leucocytes before, during and after myiasis by Dermatobia hominis in experimentally infected rats

Expression of circulating white blood cells was investigated in rats (Rattus norvegicus) experimentally infected with larvae of Dermatobia hominis, the human bot fly. Leucocytes were counted prior to infection (control group) as well as at 6, 10, 15, 20 and 28 days post-infection (dpi) and at 7, 15, 30 and 60 days post-larval emergence (dple). Total leucocyte numbers did not differ markedly among the groups. Significant differences were registered when values from control and animals harboring each larval stage of D. hominis were compared; with crescent rank: L1-, L2-, control and L3-infected groups. Leucocyte numbers were significantly higher in the control, 15, 20 or 28 dpi groups than in the 6 dpi animals. Higher counts were observed in control, L2- or L3-infected rats than L1-infected animals. Neutrophils, eosinophils and both large and small lymphocytes were also counted and analyzed. Basophils and monocytes were insufficient in number to permit statistical studies. These results stimulate the continuity of the studies about the host-parasite relationship in the dermatobiosis.

A expressão de leucócitos sangüínea foi investigada em ratos (Rattus norvegicus) experimentalmente infectados com larvas de Dermatobia hominis. As células foram contadas antes, durante, aos 6, 10, 15, 20 e 28 dias pós-infestação (dpi), e aos 7, 15, 30 e 60 dias pós-emergência das larvas dos hospedeiros. O total de leucócitos não apresentou marcante diferença entre todos os grupos de animais. Todavia, diferenças significantes foram observadas quanto ao parasitismo pelos estádios larvares, com nível crescente: L1, L2, controle e L3. Na comparação entre grupos: o número de leucócitos foi significativo pró-controle, -15, -20 ou -28 dpi do que aos 6 dpi; e pró-controle, -L2 ou -L3 do que para L1. Neutrófilos, eosinófilos e linfócitos (pequenos e grandes) foram também analisados. Em contraste, o número insuficiente de basófilos e monócitos não permitiram estudos estatísticos. Estes resultados estimulam a continuação dos estudos sobre a relação parasito-hospedeiro nas dermatobioses.

Humoral immune response in cattle experimentally infested with larvae of Dermatobia hominis

Foram estudadas as alteraçöes imunológicas em um grupo de seis bovinos infestados, experimentalmente, com 60 larvas de primeiro ínstar (L1) de Dermatobia hominis por animal, enquanto que outro grupo de seis animais foi utilizado como controle. Amostras de sangue tomadas, semanalmente, durante a infestaçäo experimental, foram analisadas para se detectar anticorpos anti-L1, anti-L2 e anti-L3 de D. hominis, utilizando-se a técnica de ELISA, na qual utilizou microplacas contendo amostras de soro dos animais e preparaçöes antigênicas de L1, L2 e L3. Observou-se nos animais infestados, o aparecimento de anticorpos anti-L1 desde o primeiro até o 21§ dia pós-infestaçäo (DPI) e após o 42§ DPI, enquanto que os anticorpos anti-L2 foram detectados no 21§ DPI, e no período do 35§ ao 49§ DPI, seguido de declínio até atingirem valores semelhantes aos animais controles. Näo se detectaram níveis expressivos de anticorpos para antígenos de L3. Os níveis de anticorpos anti-L1 dos animais infestados revelaram absorbância (D.O.) alta, ou seja, acima de 1,.500 a 492nm quando comparado ao valor médio de 0,096 obtido nos animais controles, o que também ocorreu com os níveis de anticorpos anti-L2 no 21§ DPI, nos quais dois animais apresentaram valores de D.O. de 0,450 e 0,900 a 492nm, em relaçäo ao valor discriminante (cut-off) estimado em 0,110 dos animais controles. Verificou-se um aumento dos níveis de anticorpos anti-L2 em quatro animais que também apresentaram resposta contra antígenos de L1. Os resultados obtidos com a técnica de ELISA, pressupondo-se uma prevalência de 50 por cento, quando comparados com a técnica padräo de imunodifusäo dupla, revelaram uma concordância de 98 por cento. Discutiu-se ainda a associaçäo entre infestaçäo e presença de anticorpos específicos.